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玫瑰的组织培养和快速繁殖方法

发布于:2014-12-05 09:33:05 来自:园林景观/园林植物 [复制转发]
玫瑰属蔷薇科蔷薇属植物,不但具有一定的园林观赏价值,而且有较高的经济价值和药用价值。玫瑰常规以分株、压条、扦插等方法繁殖,繁殖率较低。现有一玫瑰生产基地开展研究建立玫瑰的快速繁殖体系,并为玫瑰的工厂化生产和规模化种植提供科学依据。

1、材料:玫瑰

2、研究方法:以ms或1/2ms为基本培养基,附加不同浓度的6-ba、iaa、iba、naa等,蔗糖3%,琼脂0.35%,ph5.8,培养温度为25℃,光照时间每天12小时,光照强度约1500lx。将启动培养基上腋芽长出的无根苗剪成单芽茎段,转人不定芽诱导培养基上,诱导不定芽产生;不定芽继代周期为5周,增殖培养时将不定芽块切割成小芽块转至增殖培养基中,每100毫升培养瓶中接种3个芽块;生根前将较弱的无效苗转人壮苗培养基中促使苗健壮;生根培养时将高约3厘米左右的芽剪下插入生根培养基,生根苗移栽采用“二步法”。

1、无性系的建立。2005年6月从该院校园栽培的植株上取生长健壮的半木质化枝条,依常规方法灭菌处理后,剪成茎尖和带腋芽茎段,接种于无性系建立培养基上。⒛天后统计实验结果显示,就无性系建立而言,基本培养基ms比1/2ms效果好,在基本培养基中附加每升0.5毫克的6-ba和每升0.05毫克naa,有利于愈伤组织的诱导和芽的萌生,愈伤组织诱导率可达16.5%,萌芽率为52.9%,且芽生长健壮。

2、不定芽的诱导。将无性系幼茎切成单芽茎段,分别接种在不定芽诱导培养基上,结果表明,以ms为基本培养基,附加每升1~3毫克的6-ba和每升0.1~0.5毫克的naa,均可高频诱导产生不定芽,当6ba以较高浓度与naa配合使用时,芽诱导率均为100%,产生的不定芽数量多,但茎不伸长,均为叶片,长势弱;较低浓度6-ba与每升0.1毫克naa配合使用,虽然不定芽诱导率下降,但芽长势良好。说明ms附加较低浓度的6-ba与naa利于玫瑰不定芽诱导与生长。同时发现,诱导产生的包埋于培养基中的不定芽长势最好,可能与其充分吸收营养有关。

3、芽的继代增殖培养及有效苗的产生。将产生的不定芽块切割成小芽丛进行继代增殖培养,增殖培养基为ms+6ba每升0.3毫克+naa每升0.05毫克,继代周期为5周。在此培养基上,玫瑰仍以不定芽方式增殖,且大部分不定芽明显增高,叶片展开,长势较好。每l00毫升培养瓶接种3个芽块,经过一个继代周期培养,芽总数达132个,增殖系数为3.77。其中,高度在3厘米左右,能用于生根的有效苗的比率为43%,将较矮、长势弱的无效苗剪下,转到1/2 ms壮苗培养基上,培养20天左右,芽苗明显长高、健壮,叶片舒展,叶色浓绿,可用于生根。

4、激素浓度对生根的影响。将增殖培养基上高度在3厘米左右的芽剪下,与壮苗后的芽一起插人生根培养基中诱导生根。结果显示,玫瑰为难生根植物,不同培养基和激素浓度对玫瑰生根的影响差异较大。培养基中无机离子强度对玫瑰生根有明显影响,无机离子减半有利于生根。单独附加每升0.2~0.5毫克的iaa、iba或naa对根的产生及根的生长均有促进作用。每升0.2~0.5毫克的iaa与每升0.2~0.5毫克iba配合使用,生根率明显提高,平均为38.6%,且切口端愈伤化程度低,产生的根短而粗壮,利于移栽;iaa、iba、naa二者配合使用,生根效果最佳,生根率最高达16.3%,产生的根粗壮、数量多,便于移栽成活。筛选出最佳生根培养基为1/2ms+每升iaa0.5毫克+每升iba0.5毫克+每升naa0.2毫克。

5、炼苗与移栽。将生根的组培苗在室内打开瓶盖炼苗2~3天后,在自来水中洗净根部培养基,移人珍珠岩苗床,外搭塑料拱棚及遮阳网,控制光照度在5000~10000lx以内,温度在15℃~35℃,湿度在85%以上,每周喷1次10%的ms大量元素营养液,2周后逐渐打开小拱棚,增加光照,4周后,便可进行常规管理。此法移栽,成活率可达94.3%。

试验结果表明,适合玫瑰不定芽诱导的培养基为ms+6-ba每升1.0毫克+naa每升0j毫克;适合芽增殖的培养基为ms+6-ba每升0.3毫克+naa每升0.05毫克,在此培养基上芽的增殖系数为3.77,可直接用于生根的有效苗的比率为43%;适合芽生根的培养基为1/2ms+iaa每升0.5毫克十iba每升0.5毫克十naa每升0.2毫克,在此培养基上芽的生根率为76.3%。生根苗炼苗后以珍珠岩作基质,移栽成活率为94.3%。据计算,当增殖系数为3.ll、生根率为76.3%、移栽成活率为94.3%时,1个芽经1年10代培养,可产生约58万个芽,考虑到生产设施及人力等因素的限制,如此多的芽不可能一次全部生根,导致无法处理,甚至倒苗。因此,在实际生产中,如果从第7代开始将高度在3厘米左右43%芽进行生根与移栽,则1年可由1个芽生产3349株商品苗;同样,如果从第8代开始,1年l个芽可生产12,000余株商品苗。这样,对降低成本、提高效益是十分必要的。

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