特点——“三高一广一快”

①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。

②高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。

③高灵敏度：紫外检测器可达0.01 ng,进样量在μL数量级。

④应用范围广：70%以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是对高沸点、大分子、强极性、热稳定性差的化合物的分离分析，更具有优势。

⑤分析速度快、载液流速快：较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品需15～30 min，有些样品甚至在5 min内即可完成。

主要结构

高效液相色谱仪可分为“高压输液泵”、“色谱柱”、“进样器”、“检测器”、“馏分收集器”以及“数据获取与处理系统”等部分。其各自的作用如下：

高压输液泵——驱动流动相和样品通过色谱分离柱和检测系统；

色谱柱——分离样品中的各个物质；

进样器——将待分析样品引入色谱系统；

检测器——将被分析组在柱流出液中浓度的变化转化为光学或电学信号；

数据获取和处理系统。

图2 液相色谱仪结构

分离原理

以液-液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography)为例。流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶（极性不同，避免固定液流失），有一个明显的分界面。当试样进入色谱柱，溶质在两相间进行分配。达到平衡时，服从于高效液相色谱计算公式：

运行及操作流程

运行：溶剂贮器中的流动相被泵吸入，经梯度控制器按一定的梯度进行混合然后输出，测其压力和流量，导入进样阀（器）经保护柱、分离柱后到检测器检测，由数据处理设备处理数据或记录仪记录色谱图，馏分收集器收集馏分，排出废液。

操作：流动相和水相各超声30 min——打开仪器(从上至下，关掉的时候相反)——打开软件-选择方法-设置样品表——初始化，打开泵A——模块详细信息-净化-将排液阀旋转180-点击A 2 min- D 2 min- 扭回排液阀——数据采集-选择样品表-模块详细信息-手动设定-清洗柱子（30 min，至少最后15 min不出峰表示清洗干净）——连续分析开始，测定样品——结束后用100%有机相冲洗柱子20 min，随后关闭仪器——根据出峰时间判断物质，根据峰面积判断浓度。

高效液相色谱法作为一种高效、高灵敏度的分离分析方法，在现在的科学研究领域有着广泛的应用，如需要对一些有机物的组分或者含量进行分析，可以尝试探索对应的液相检测色谱进行检测。